Poly(I:C)对PRRSV诱导的抗病毒免疫反应的影响

为了研究聚肌苷胞对猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)诱导的抗病毒免疫反应的影响,本研究采用200个TCID50的PRRSV感染猪肺巨噬细胞(porcine alveolar macrophage,PAM),吸附1h后用100μg/L的聚肌苷胞(poly(I:C))处理细胞,分别培养12、24、36、48 h后收集细胞及上清,同时设PRRSV感染对照组、poly(I:C)刺激对照组和健康细胞对照组,用实验室已经建立的Real-time qPCR方法对poly(I:C)刺激PRRSV感染组和PRRSV感染对照组中PRRSV复制水平及各组PAM细胞中IFNα、TNF-αmRNA转录水平变化进行定量分析.结果显示,PRRSV在感染PAM细胞后12～24 h期间可促进PAM细胞IFN-α mRNA的转录,36～48 h期间抑制PAM细胞IFN α mRNA的转录;TNF-α mRNA转录水平在1 2、48 h后略微升高,在24、36h后均略微下降.Poly(I:C)处理PAM细胞后IFN-α、TNF-α mRNA转录水平均上调.Poly(I:C)+PRRSV组IFN-α mRNA的转录水平与PRRSV组相比在12～36 h均显著升高,在48 h后则显著下调.Poly(I:C)+PRRSV组TNF-α mRNA转录水平与PRRSV组相比,12～36 h后均升高,在12h升高较显著,48 h后则显著下调.结果表明,PRRSV感染PAM细胞经Poly(I:C)刺激后IFN-α、TNF-α mRNA转录水平在12～36 h后显著升高,从而抑制了PRRSV在PAM细胞内的复制.