犬BMSCs复合3D打印支架制备组织工程半月板及体外成软骨诱导时间对其分化的影响

为了制备3D打印犬组织工程半月板支架并评价其性能,探索体外成软骨诱导时间对犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)-支架复合物生长分化的影响,本试验使用3D打印技术制备聚己内酯(PCL)半月板支架,肉眼和扫描电镜观察支架形态及微观结构,生物力学试验测定支架压缩模量,使用CCK-8细胞毒性试验评价支架与细胞的相容性,并接种犬BMSCs在体外分别进行成软骨诱导7、14、21、28 d,通过倒置相差显微镜观察细胞在支架上的生长情况,通过测定不同诱导时间糖胺聚糖(GAG)含量和Ⅱ型胶原的表达量,分析和比较不同体外诱导时间对其基质合成的影响.结果 显示,3D打印制备出的PCL支架对天然半月板解剖形状的还原度较高,孔隙均匀且孔间连通性好,有一定的力学抗压性能和缓慢的降解速度,接种其上的细胞数量呈递增趋势;在BMSCs-支架复合物的体外诱导过程中,细胞不断增殖,GAG和Ⅱ型胶原合成量都随诱导时间的延长而增加,诱导21 d时的合成量显著高于其他诱导时间的合成量(P＜0.05).结果 说明,3D打印制备的PCL半月板支架具有良好的理化性能和细胞相容性,有望作为半月板组织工程支架,且体外诱导时间对BMSCs-支架复合物向软骨分化具有重要影响.