鸡三种天然免疫相关受体和配体荧光定量PCR 检测方法的建立及应用

为建立检测鸡天然免疫相关受体（Ch-MDA5、Ch-TLR3和 Ch-TLR7）及其相应配体（MAVS、TRIF 和 MyD88）的荧光定量 PCR 方法并评价其应用效果，设计和筛选特异性 PCR 引物，制备各基因的质粒标准品，绘制荧光定量 PCR 的标准曲线，并对方法的灵敏度、重复性和特异性进行检验。结果表明，所建立的检测方法敏感度高、特异性强、检测线性范围广、重复性好。应用建立的方法检测新城疫油乳剂灭活苗免疫 SPF 鸡后上述基因表达的变化，发现免疫后6 h 各基因的表达水平达到峰值，表明疫苗免疫迅速有效地激活了机体的天然免疫应答。建立了与鸡抗病毒感染天然免疫相关的3种细胞受体和相应配体的定量检测方法，可应用于病毒致病机制、鸡用新型疫苗、免疫增强剂以及抗病毒药物的研究与开发。