糙皮侧耳与酿酒酵母原生质体电融合条件的研究

为构建兼取木质素降解能力强和生长速度快的新型菌株，以糙皮侧耳和酿酒酵母原生质体为亲本，采用双亲灭活标记方法，通过L16（45）正交试验研究交变电压、交变电场频率、脉冲场强、脉冲个数和脉冲间隔对两亲本电融合率的影响，利用拮抗试验和菌丝形态学比较方法对再生菌株进行筛选，RAPD分子标记方法对疑似融合株进行鉴定。结果表明：糙皮侧耳和酿酒酵母原生质体的最佳融合条件为交变电压30 V，交变电场频率1100 kHz，脉冲场强6 kV/cm，脉冲次数4个，脉冲间隔10μs，融合率达到4.396×10-5。筛选出的3株疑似融合株均为亲本原生质体融合产物。