血清8型禽腺病毒纤突蛋白基因的克隆表达及多克隆抗体的制备
China Poultry（2018）
摘要
研究首先对血清8型禽腺病毒(FAdV-8)的纤突蛋白基因F进行了克隆并分别构建了原核表达载体和真核表达载体,经测序验证后分别命名为pGEX-6P-1-F和pcDNA3.1-F.将原核表达质粒pGEX-6P-1-F转化BL21,经IPTG诱导,获得了FAdV-8F蛋白的GST-F可溶性融合表达产物.将纯化的GST-F蛋白免疫BALB/c小鼠制备了抗FAdV-8 F蛋白的多克隆抗体.Western blot结果证明,制备的抗FAdV-8 F蛋白的多克隆抗体能特异性地识别转染pcDNA3.1-F或感染FAdV-8病毒细胞中57 ku大小的蛋白条带.间接免疫荧光试验同样证明,抗FAdV-8的F蛋白的多克隆抗体具有良好的反应性及特异性.研究结果为进一步建立FAdV-8快速血清学诊断方法、亚单位疫苗研制及探究纤突蛋白F在病毒感染致病中作用奠定了基础.
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