番鸭细小病毒Rep1蛋白的原核表达及多克隆抗体制备
China Poultry（2018）
摘要
Rep蛋白在番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus,MDPV)感染中的作用尚不清楚.研究将MDPV的Rep1基因克隆入pET-28a原核表达载体并转化BL21 (DE3)大肠杆菌,在IPTG诱导下成功表达了分子量约为82 ku的目的蛋白,菌体分析表明目的蛋白主要以包涵体存在.将重组蛋白切胶免疫ICR小鼠,制备了针对Rep1蛋白的多克隆抗体.在间接免疫荧光试验中,Rep1多克隆抗体能与鹅胚成纤维细胞上增殖的MDPV特异性发生反应,免疫印迹试验则显示Rep1多克隆抗体能够在MDPV感染的GEF中识别出两条蛋白条带Rep1和Rep2.结果表明制备的Rep1多克隆抗体具有良好反应特异性,为深入研究Rep蛋白在MDPV感染中的作用奠定了基础.
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