产气荚膜梭菌NetB毒素基因重组植物乳酸杆菌疫苗免疫保护性研究

为了评估表达产气荚膜梭菌NetB毒素的重组植物乳酸杆菌口服活菌疫苗对鸡的免疫保护效果,分别进行了重组活菌疫苗的免疫和产气荚膜梭菌攻菌试验.免疫组雏鸡分为3组,于7～28日龄分别连续免疫pSIP409空载体植物乳酸杆菌、pSIP409-NetB重组植物乳酸杆菌和灭菌PBS;攻菌组雏鸡免疫方法同上,于43 ～47日龄连续口服产气荚膜梭菌(设置PBS免疫对照组和不攻菌只口服等量PBS对照组).通过采用ELISA检测抗体动态变化,观察雏鸡体重变化和免疫器官发育情况以评价疫苗的免疫效果.结果显示,NetB组特异性抗体IgG和sIgA水平随日龄增长呈现上升趋势,且与未免疫对照组存在显著或极显著差异(P＜0.05或P＜0.01);NetB攻菌组各项指标在短暂下降后很快升高,且明显高于未免疫对照组雏鸡(P＜0.01).NetB组周增重14日龄后均高于其他组,且35日龄开始与其他组差异极显著(P＜0.01);攻菌组体重变化总趋势是NetB攻菌组最高,其次是空载体攻菌组(P＜0.05),PBS攻菌组最低(P＜0.01).免疫组在免疫结束时胸腺和脾脏指数呈明显上升趋势,NetB组的这两项指数分别在56日龄和49日龄达到最高,法氏囊指数在28日龄下降,随后稳步上升;虽然攻菌后各免疫器官指数上升趋势变缓,但NetB攻菌组的各项指数在各时间点均与其他组差异极显著(P＜0.01).表明重组口服活菌疫苗对产气荚膜梭菌攻击雏鸡起到很好的保护作用,所构建的重组疫苗安全有效,结果为重组植物乳酸杆菌表达系统应用于口服疫苗提供了理论依据.