猪流行性腹泻病毒S蛋白不同表位基因的原核表达及免疫原性分析

纤突蛋白S是猪流行性腹泻病毒(PEDV)表面的重要糖蛋白,S蛋白的S1和S2两个亚基能刺激宿主细胞产生中和抗体,对预防和控制PEDV的感染具有重要意义.本研究根据PEDV基因组S蛋白序列,分别构建pET32a-S1、pET32a-S2及S1和S2的串联重组质粒pET32a-2S,将3个重组质粒分别转染至BL21感受态细胞中进行蛋白表达,经Western blot鉴定,这3种蛋白能够成功表达.将3种蛋白纯化后,分别免疫小鼠制备多克隆抗体,同时应用ELISA方法进行免疫原性分析.结果表明,S1、S2及2S蛋白均具有一定的免疫原性,2S蛋白产生的抗体效价明显高于S1、S2,表明2S蛋白的免疫原性较好.猪流行性腹泻病毒S蛋白的成功表达及免疫原性分析,为PEDV亚单位疫苗的研究奠定了基础.