犬干扰素α2的原核表达及抗病毒活性分析

Ling-yun YAO,Jing-yu WANG,Wei OUYANG,Jing QIAN,Shi-yan WU,Xing-xia XIA,Yu-mei ZHU,Xiao-li WANG,Qun-xing PAN,Rong RUI,Yong-shan WANG

Chinese Journal of Veterinary Parasitology（2018）

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摘要

本研究将人工合成的犬干扰素α2成熟区序列插入原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pET-28a-CaIFN-α2;然后将该质粒转化至大肠杆菌Rosetta感受态中进行IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot分析鉴定,分子量约为23 kDa的目的蛋白表达,表达的重组蛋白主要以包涵体的形式存在,表达量约占菌体总蛋白的52.5%.包涵体蛋白经变性、复性和纯化处理后,获得的重组CaIFN-α2纯度为92%;用MDCK/VSV微量细胞病变抑制法检测重组蛋白的抗病毒活性为3.16×106/mL.本研究结果为进一步研制新型犬用干扰素制品奠定了物质基础.

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关键词

Recombinant canine interferon α2,prokaryotic expression system,antiviral activity

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