猪瘟病毒Npro蛋白的原核表达与多抗制备
Chinese Journal of Veterinary Parasitology（2015）
Abstract
为更好研究猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV) Npro蛋白的生物学功能,RT-PCR扩增CSFV的Npro基因,克隆至pCold Ⅰ质粒并转化BL21(DE3)表达菌.经IPTG诱导,成功表达了约24 kDa的重组蛋白His-Npro,用镍离子亲和层析柱进行纯化后,制备了兔源多克隆抗体Western blot结果显示,制备的多克隆抗体能特异性识别猪瘟病毒感染PK15细胞内表达的约23kDa的Npro蛋白,但此抗体不能用于Npro蛋白的间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay,IFA)检测.纯化的重组蛋白His-Npro和制备的Nprp多抗为Npro蛋白功能研究奠定了基础.
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