马疱疹病毒4型QuantStudioTM 3D数字PCR检测方法的建立

旨在建立一种高灵敏度的检测马疱疹病毒4型的3D数字PCR(3D-dPCR)方法,为马鼻肺炎的早期诊断提供技术支持.通过优化3D-dPCR反应体系中引物和探针的浓度和退火温度,评估其灵敏性、特异性、重复性.结果 显示,建立的3D-dPCR方法中引物和探针的最佳浓度分别为0.4、0.13μmol/L,最佳退火温度为60℃.该方法的R2为0.996 4,具有良好的线性关系,灵敏度高,最低检测限为5.4 copies/μL;与马疱疹病毒1型、马泰勒虫、马动脉炎病毒的核酸无交叉反应;RSD小于5％.结果 表明,本研究中建立的3D-dPCR方法灵敏度高、特异性强,可作为马疱疹病毒4型定量检测的方法.