豆状囊尾蚴外泌体的分离鉴定及其对家兔免疫应答的调节作用

为探究豆状囊尾蚴外泌体对家兔免疫应答的调节作用,以收集的豆状囊尾蚴分泌排泄产物(ESP)为材料,通过差速离心法分离外泌体,经透射电镜和Western-blot分别对其形态和标志分子进行鉴定.分别用外泌体和ESP免疫家兔,ELISA方法检测家兔血清中特异性抗体和血清细胞因子水平,并通过人工攻虫感染评价其免疫保护效果.结果 显示,豆状囊尾蚴外泌体直径为30～150 nm,呈圆形或椭圆形,有完整的脂质双分子层膜结构,且含有外泌体标志蛋白CD63.而且,外泌体免疫组血清特异性抗体、IL-10和IL-4的水平显著升高(P＜0.05),而IFN-γ和TNF-α显著降低(P＜0.05)或差异不显著.经剖检发现,豆状囊尾蚴ESP免疫组和外泌体免疫组的减虫率分别为65.17％和24.88％.结果 表明,外泌体通过上调宿主抑炎因子的表达,诱导宿主产生了Th2型细胞免疫应答,从而有利于囊尾蚴在宿主体内的存活.