山羊关节炎脑炎病毒SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法的建立及应用

为建立检测山羊关节炎脑炎病毒(caprine arthritis-encephalitis virus,CAEV)的快速诊断方法,本研究根据CAEV甘肃株Gag基因设计1对引物,并以含有CAEV甘肃株全基因组序列的质粒pUC57-CAEV为模板,建立CAEV的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法,并验证其特异性、灵敏性和重复性.结果 显示,本研究所建立的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的Ct值与标准品模板在1.19×109～1.19×101copies/μL范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.997,斜率为-3.74,检测下限为1.19×101 copies/μL,且对痘苗病毒、山羊痘病毒均无扩增.重复性试验结果显示,批间与批内变异系数均小于1％,重复性好.本研究首次建立了CAEV Gag基因的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法,为CAEV的快速检测和病毒感染预防提供了技术手段.