病毒性出血败血症病毒实时荧光RT-RPA恒温检测方法的建立
Chinese Veterinary Science（2020）
Abstract
为建立一种简单、快速的病毒性出血败血症病毒(VHSV)检测方法,本研究通过比较分析VHSVN基因的保守序列,设计了多对引物和一条探针.经过筛选优化,建立了实时荧光RT-RPA检测方法.该方法在39℃恒温反应20 min即可快速、特异性地检测出VHSV,与其他水生动物病毒不发生交叉反应,该方法检测限为1.83×103PFU/mL,利用本研究方法对30份鲑鳟鱼临床样品以及9份鱼类疫病病原样品进行检测,检测结果与荧光定量PCR方法结果一致.上述结果表明,本研究建立的检测方法操作简单,反应灵敏,结果可靠,仪器依赖性低,适用于现场对VHSV快速检测.
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