兔出血症病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

Zheng-qun MENG,Gui-li LI,Li-jun ZHOU,Yi-yi LENG,Yi-lin LUO,Ya-dong LIU,Yin WANG,Xue-ping YAO,Ze-xiao YANG

Chinese Veterinary Science（2017）

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摘要

为建立快速检测兔出血症病毒(RHDV)的TaqMan荧光定量PCR方法,根据RHDV VP60基因保守序列设计1对特异性引物和1条探针,进行条件优化,检测重复性、敏感性和特异性,建立了RHDV Taq-Man荧光定量PCR方法.结果显示,标准品浓度在2.8×106～2.8×102 copies/μL范围内具有良好的线性关系,最低可检测到2.8×101 copies/μL的标准品阳性质粒,变异系数小于2％.结果表明,建立的TaqMan荧光定量PCR方法的特异性、敏感性、重复性均达到试验设计要求,能快速检测临床样品中的RHDV,为我国RI IDV的检测及其定量检测的相关研究提供了一种可靠的技术工具.

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