ova-miR-34a-5p在山羊痘病毒感染过程中的动态表达及其靶标基因的鉴定

为了研究ova-miR-34a-5p在山羊痘病毒感染过程中的生物学功能,利用qPCR、双荧光素酶报告基因检测系统等方法,筛选了ova-miR-34a-5p的qPCR引物,分析了它在山羊痘病毒感染后不同时期的动态表达谱,筛选并验证了其靶标分子.结果显示,与山羊痘病毒感染前(0 h)相比,ova-miR-34a-5p的表达水平在感染后第0.5、4和10小时没有明显变化(P＞0.05),而在感染后第24小时明显升高(P＜0.05),之后在感染后第48小时又有所下降(P＞0.05),这可能与病毒的DNA合成有一定的联系.在预测的ova-miR-34a-5p靶标分子中,有一些是转录因子包括mycn.荧光素酶报告基因检测结果显示,mycn-WT(野生型)+ova-miR-34a-5p类似物共转染组与mycn-WT(野生型)+阴性共转染对照组相比差异极显著(P＜0.01),其相对表达量约为对照组的0.65,而mycn-mut(突变型)+ova-miR-34a-5p类似物共转染组与对照组相比差异不显著(P＞0.05),表明ova-miR-34a-5p可以抑制转录因子mycn的表达.以上研究结果说明,ova-miR-34a-5p可能通过调节mycn基因的表达水平影响病毒DNA合成,但其具体机制还需要进一步研究.