表达水泡性口炎病毒G蛋白的重组腺病毒的构建与鉴定
Chinese Veterinary Science（2015）
摘要
为了以复制缺陷型人5型腺病毒为表达载体,构建表达水泡性口炎病毒印第安纳型(VSV-IN)G蛋白的重组腺病毒,利用PCR扩增编码VSV-IN G蛋白的基因,并将其克隆至腺病毒穿梭载体pacAd-CMVK-NpA中;再将含有目的基因的重组穿梭质粒与腺病毒骨架载体质粒用Pac Ⅰ酶切线性化后共转染AAV-293细胞,获得重组腺病毒rAd-VSV-IN-G.该重组腺病毒于AAV-293细胞连续传代至第20代效价稳定.间接免疫荧光试验和Western-blot检测结果显示,G蛋白在重组腺病毒中可以被正确表达.上述研究成果为VSV重组腺病毒疫苗的研制奠定了基础.
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