绵羊γ干扰素在家蚕杆状病毒表达系统中的表达及产物的抗病毒活性

干扰素(IFN)具有广谱的抗病毒作用,利用杆状病毒表达系统安全、高效和后加工过程完整的特点,在家蚕体内表达生产重组绵羊γ干扰素(OviIFN-γ).依据家蚕的密码子偏好性对OviIFN-γ基因核苷酸序列进行优化和PCR,并克隆了带有His标签编码序列的OviIFN-γ基因序列OviIFN-His-Tagged-γ,构建分别插入OviIFN-γ和OviIFN-His-Tagged-γ基因的重组病毒.将2种重组病毒感染家蚕5龄幼虫,Western blot检测蚕体血淋巴中重组OviIFN-γ和OviIFN-His-Tagged-γ成功表达.采用细胞病变抑制法测定蚕体血淋巴中重组OviIFN-γ的效价为1.6x106 U/mL,重组OviIFN-His-Tagged-γ的效价为2.8×105U/mL,前者的抗病毒活性强于后者,稀释至2.0×104倍时,能够完全抑制VSV-GFP病毒感染.上述结果为利用家蚕杆状病毒表达系统在蚕体内高效、安全生产具有抗病毒活性的重组绵羊γ干扰素提供了试验依据.