家蚕蜕皮激素受体和超气门蛋白基因的诱导表达模式及蜕皮激素响应元件核心保守区的识别

核受体基因家族是介导昆虫蜕皮激素(20E)作用的关键信号分子.为了研究家蚕丝腺中核受体异源二聚体编码基因——蜕皮激素受体基因BmEcR和超气门蛋白基因BmUSP的表达模式,应用实时荧光定量PCR技术检测家蚕5龄幼虫正常状态下和用2×10-3μg/μL蜕皮激素处理后BmEcR与BmUSP在丝腺组织中的表达变化.结果表明,20E处理后,BmEcR-A、BmEcR-B1和BmUSP在中、后部丝腺的表达量与对照组相比均有不同程度增加,说明20E能够促进BmEcR-A、BmEcR-B1和BmUSP基因的表达;但中部丝腺与后部丝腺BmEcR-A、BmEcR-B1和BmUSP基因的表达变化趋势不同.利用等温滴定量热技术(ITC)获得的家蚕蜕皮激素受体结构域蛋白BmEcR-B1D与蜕皮激素响应元件BmE75A-EcRE及其缺失突变体相互作用的亲和力常数(K)、反应热(ΔH)和熵(ΔS),显示了BmEcR-B1D蛋白能够与BmE75A-EcRE进行结合,并发现BmE75A-EcRE的核心保守区为编码序列TCTTC,推测该区域有可能是BmEcR-B1D蛋白结合在BmE75A-EcRE上的精确位点.