食源性单核细胞增生李斯特菌lmoF2365_0037基因克隆及序列分析
Modern Journal of Animal Husbandry and Veterinary Medicine(2020)
Abstract
为了对食源性单核细胞增生李斯特菌LM5567的lmoF2365_0037基因进行克隆和序列分析.试验利用PCR方法对lmoF2365_0037基因进行扩增,连接pMD19-T载体进行克隆,筛选阳性菌株进行测序比对分析.结果显示:扩增获得的lmoF2365_0037基因序列长为548 bp,克隆得到lmoF2365_0037基因的阳性转化子;生物信息学分析表明:lmoF2365_0037蛋白属于跨膜蛋白,无信号肽序列;二级结构中无规则卷曲和延伸链比例较大,分别是46.31%和32.89%;序列比对结果表明,LM5567株lmoF2365_0037基因核苷酸序列与02-6680株(4b,奶酪,加拿大)、10-0811株(1/2b,螃蟹,加拿大)、10-0809株(4b,粪便,加拿大)、81-0558株(4b,脑脊髓液、加拿大)、02-1103株、02-1792(4b,奶酪,加拿大)、81-0861株(4b,卷心菜,加拿大)相似性均为100%;LM5567 lmoF2365_0037基因编码的氨基酸序列与上述菌株相似性均为93.3%.本试验成功克隆了lmoF2365_0037基因,为进一步探究lmoF2365_0037基因的功能奠定了基础.
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