葡萄籽原花青素对绵羊前脂肪细胞增殖与分化的影响

试验旨在研究葡萄籽原花青素(Grape Seed Proanthocyanidin Extract,GSPE)对绵羊前脂肪细胞增殖与分化的影响.选择1月龄健康小尾寒羊公羔羊,屠宰后取腹股沟白色脂肪组织.分离绵羊前脂肪细胞,并进行原代体外培养.诱导分化后,进行油红O的染色鉴定.将传代培养后的绵羊前脂肪细胞随机分成6个处理组,每个处理组3个重复,培养基内添加不同浓度GSPE(0、6.25×101、1.25×102、2.5×102、5×102、1×103 ng/mL).培养结束后,用CCK-8法测定GSPE对绵羊前脂肪细胞增殖的影响.绵羊前脂肪细胞由诱导分化培养基和分化培养基处理后,再用含不同浓度GSPE(0、6.25×101、1.25×102、2.5×102、5×102、1×103 ng/mL)的培养基培养.培养结束后,测定甘油三磷酸脱氢酶(G3PDH)、脂肪酸合成酶(FAS)以及FASmRNA、激素敏感脂肪酶mRNA(HSLmRNA).结果表明:不同浓度的GSPE具有促前脂肪细胞增殖的作用,且有明显的时间和浓度效应;在分化试验中,与对照组相比,不同浓度的GSPE能明显抑制TG合成,但在诱导分化第8天,仅6.25×101、1.25×102 ng/mL的GSPE对TG的合成有抑制作用;在诱导分化后期,GSPE降低了脂肪沉积过程中关键酶G3PDH、FAS的活性,对FAS mRNA的表达无明显影响(P>0.05),显著降低HSL mRNA的表达(P<0.01),并且GSPE是通过同时作用脂类生成与脂解来抑制脂肪沉积.