DNA免疫技术制备H10亚型禽流感病毒HA蛋白单因子血清的研究
Chinese Journal of Veterinary Drug（2020）
Abstract
为优化H10亚型禽流感病毒快速检测方法,按照鸡偏嗜性密码子将A/Jiangxi/IPB13/2013(H10N8)的血凝素(HA)基因序列优化后人工合成,克隆至真核表达载体pCAGGs.将重组质粒双酶切后测序证明该质粒构建成功.用200μg的表达载体免疫6周龄SPF鸡,分别在第一次免疫后的第30天和第60天用相同剂量实施第二次和第三次免疫,末次免疫后的第10天心脏采血,分离血清,制备单因子血清.间接免疫荧光试验和western blot试验证明HA蛋白成功表达,单因子血清制备成功.血凝抑制试验结果表明抗体效价≥128,单因子血清特异性强,与其他亚型禽流感病毒无交叉反应.该研究为H10亚型流感病毒快速鉴定和研究奠定了基础.
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