仔猪副伤寒活疫苗生产用菌株生长曲线的建立及合成培养基初步应用

建立了仔猪副伤寒活疫苗生产用菌株生长曲线，获取菌株培养参数，从而实现合成培养基初步应用。将猪霍乱沙门氏菌（CVCC79500株）运用试管和三角瓶分别静置和振荡培养30 h，期间取4、8、12、18、24、30 h 等6个点进行活菌计数并建立生长曲线，确定37℃静置培养18～24 h，37℃、200 r／min 振荡培养8～24 h 为培养稳定期。不同接菌量比较结果表明，37℃静置培养24 h，37℃、200 r／min 振荡培养12 h 均可达到菌体稳定期。在稳定期参数条件下，比较合成培养基与常规普通肉汤培养基对该菌的增殖效果，结果表明，37℃静置培养24 h，试管及三角瓶培养菌数分别为27×108～31×108、33×108～41×108 CFU ／mL；37℃、200 r／min 振荡培养12 h，试管及三角瓶培养菌数分别为58×108～66×108、78×108～88×108 CFU ／mL。而同条件3批普通肉汤培养菌数均低于合成培养基，且批次间稳定性较合成培养基差。将合成培养基振荡培养12 h 的菌液接种小鼠均10／10存活；免疫后攻毒家兔达4／5～5／5保护，与普通肉汤基本一致。合成培养基保存期试验表明，25℃避光保存28 d 与当天配制的液体合成培养基，振荡培养菌数基本一致。获取的培养参数适合用于合成培养基的初步评价，研制的合成培养基培养菌数优于普通肉汤，且不影响菌体安全性及免疫原性，室温保存期可达28 d。