滇南某猪群致死性呼吸道传染病的病原学诊断
Chinese Journal of Veterinary Drug(2017)
Abstract
近期红河州某规模化养猪场在引种后,发生以发热、腹泻、呼吸困难、濒死前鼻孔出血为特征的仔猪传染病,尝试用多种药物治疗均不能有效控制病情,死亡率很高.为调查该病病因,本试验对采集自病死猪只的肺脏、脾脏、肾脏和淋巴结,取病料组织划线于血琼脂平板培养,对形成的溶血性菌落采用高盐培养、革兰染色、生化试验做初步鉴定,同时使用细菌16S rRNA基因通用引物扩增该菌株DNA片段,琼脂糖凝胶电泳回收扩增产物,经TA克隆后测序分析;取病料组织研磨上清,应用PCR技术扩增病原核酸,以类似方法分析核酸序列.结果发现,该溶血性菌株为革兰染色阳性球菌,葡萄糖、蔗糖、木糖、山梨醇和6.5% NaCl利用试验呈阳性,麦芽糖、棉籽糖、蕈糖、七叶苷、水杨苷、VP、 PYR、硝酸盐和触酶试验均呈阴性,PCR扩增出1542 bp的特异性条带,其基因序列与脲气球菌同源性最高(94%);应用PCR技术从病料中分别直接扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)421 bp和支原体267 bp的特异性条带,前者为高致病性PRRSV毒株特有核酸片段,后者与猪鼻支原体(MHR)SK76菌株的DNA同源性达99%.试验结果表明,该猪群发生以高致病性PRRSV感染为主、伴有猪鼻支原体和类脲气球菌混合感染的急性传染病,提示必须高度重视引种携带PRRSV的风险.
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