犬血浆中特比萘芬的高效液相色谱检测方法

建立并优化一种简单、快速、灵敏、高选择性的 HPLC 方法测定犬血浆中特比萘芬血药浓度，并考察方法的稳定性。特比萘芬血浆样品经提取剂乙腈－异丙醇（用磷酸调 pH 至3．0）（40：60，V／V）液－液萃取后，提取液经40℃氮气吹干，用流动相复溶后离心过滤，取上清液20μL 进样分析，对血样处理后及标准溶液保存不同时间后的稳定性进行了考察。色谱柱 Agilent 5 HC －C18（2）柱（250 mm ×4．6 mm，5μm）；流动相甲醇－0．1％磷酸水（59：41，V／V）；流速0．8 mL／min；紫外检测波长223 nm；柱温35℃。色谱峰分离良好，无干扰。特比萘芬最低检测浓度为0．01μg／mL，线性范围是0．02～5μg／mL，相关回归方程：y ＝356．28x －2．0311（r2＝0．99989）。低、中、高血浆质控样品日内 RSD 均小于5％，日间 RSD 均小于7％，方法平均回收率分别为108．9％，100．4％，102．1％。血样处理后8 h 内样品能保持较好稳定性，血样处理后3次循环冻融能保持较好稳定性。血样处理后于－20℃条件下冻存能够保持稳定2个月，标准溶液有效保存期同样为2个月。本研究建立的特比萘芬血样浓度测定方法有较高的准确度和灵敏度，适用于候选化合物的体内药代动力学研究。