利用总蛋白评价猪肺炎支原体HN0613株免疫原性的研究

猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)是一类无细胞壁的原核微生物,体外培养难度大,其滴度一般通过颜色变化单位(colour change unit,CCU)来反映,但该方法检测值跨度较大,无法进行精准定量.为了更加准确地评价Mhp的免疫原性,对Mhp HN0613株的总蛋白进行检测,发现同等CCU滴度水平的不同Mhp样品总蛋白含量之间存在一定的差异;通过对Mhp HN0613株的CCU滴度水平、总蛋白含量和动物实验结果进行对比分析,发现在相同CCU滴度水平条件下,Mhp HN0613株的总蛋白含量与其免疫原性呈一定的正相关性.为了验证以总蛋白含量作为辅助CCU滴度评价Mhp免疫原性方法的可行性,对Mhp HN0613株进行静置培养;48 h后其CCU滴度水平为5×109 CCU/mL,且总蛋白含量达到最高,为0.030 mg/mL,高于同等CCU滴度水平、培养42 h样品的总蛋白含量;根据Mhp HN0613株的总蛋白含量与其免疫原性的相关性,表明培养48 h样品具有更好的免疫原性.动物实验结果显示,培养48 h的Mhp HN0613株样品具有更好的间接血凝试验(indirect hemagglutination assay,IHA)检测结果,证明Mhp总蛋白检测法可作为一种辅助CCU滴度评价Mhp免疫原性的可靠方法.