鸭坦布苏病毒和产蛋下降综合征病毒二重PCR检测方法的建立
Guangdong Journal of Animal and Veterinary Science（2015）
摘要
参考GenBank上已发表的鸭坦布苏病毒(DTMUV)NS5基因序列和产蛋下降综合征病毒(EDSV)五邻体(penton)基因序列,分别设计了检测DTMUV和EDSV的特异性引物,扩增目的片段大小分别为242 bp和181 bp.通过退火温度及引物浓度的优化,建立了针对这两种病毒的二重PCR检测方法.特异性试验结果表明,该方法可以同时检测DTMUV和EDSV,且不与鸭肝炎病毒、鸭瘟病毒、番鸭呼肠孤病毒、小鹅瘟病毒、番鸭细小病毒、H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒以及大肠杆菌的核酸发生交叉反应;敏感性试验表明,该方法对DTMUV 的最低检出限为590个拷贝,对EDSV的最低检出限为3 260个拷贝;该方法重复性良好,对不同批次的样品扩增效果良好.通过检测两种病毒感染的阳性病料各1 0份,结果显示,该二重PCR检测方法对阳性样品的检出率可达100％.这表明该方法可以用于鸭坦布苏病毒和产蛋下降综合征病毒的检测.
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