弓形虫MIC10基因的克隆与表达

Animal Husbandry & Veterinary Medicine(2020)

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Abstract
弓形虫MIC10基因在速殖子时期与缓殖子时期都存在不同程度的表达,但国内对该基因的研究甚少.为了解弓形虫MIC10基因的功能,构建其原核表达载体,并进行原核表达.本试验以提取的弓形虫DNA为模板,设计引物扩增MIC10基因片段,连接克隆载体pMD-18T和表达载体PGEX-4T-1,PCR和双酶切鉴定后进行原核表达.结果 表明,经PCR扩增获得597 bp的MIC10基因片段,构建pMD18-T-MIC10克隆质粒和PGEX-4T-MIC 10原核表达载体,经PCR鉴定和双酶切鉴定正确,并在大肠杆菌中成功表达,表达蛋白的分子量约为49 kD.本试验为弓形虫MIC10基因功能的后续研究奠定了基础.
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