前噬菌体对禽致病性大肠杆菌DE205B环境耐受力的影响

禽致病性大肠杆菌(avian pathogenic Escherichia coli, APEC)DE205B基因组中存在前噬菌体phiv205-1.本文利用RED同源重组技术构建前噬菌体phiv205-1缺失株,采用倍比稀释的方法检测野生株DE205B和前噬菌体缺失株DE205B△phiv205-1在酸、盐和氧化应激等不利条件下的存活率,分析前噬菌体对APEC环境适应力的影响.结果 显示,与野生株相比,前噬菌体缺失株DE205B△phiv205-1酸性耐受力下降了56.62％(P＜0.001),在氧化应激条件下的存活率下降了91.78％ (P＜0.001).为研究前噬菌体phiv205-1中影响宿主细菌对酸和氧化应激耐受的基因,采用real-time PCR检测了部分phiv205-1基因在氧化应激环境中的表达量,结果显示基因2971、2989、3327及Erf的表达量显著升高.进一步构建了△2971、△2989、△3327及△E矿的单基因缺失株,环境耐受实验结果显示,与野生株相比,单基因缺失株△2971、△2989、△3327及△Erf在H2O2环境下的存活率依次降低了89.32％、67.79％、27.84％和71.29％.研究表明,前噬菌体phiv205-1增加了细菌对环境压力的抵抗力,为宿主菌在恶劣条件下的生存提供了多种益处.