利用高效液相色谱仪测定猪乳中乳清蛋白含量的方法及其应用

为了建立快速准确检测猪乳中溶菌酶、乳铁蛋白、α-乳白蛋白、血清白蛋白和p-乳球蛋白高效液相色谱方法,采用0.1％三氟乙酸水溶液为流动相A,0.1％三氟乙酸乙腈溶液为流动相B进行程序洗脱,用Xbridge TM Sneild RP C18色谱柱对α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和溶菌酶进行分离检测,用Supelcosil C18色谱柱对乳铁蛋白和血清白蛋白进行分离检测.结果显示:5种乳清蛋白分离良好,在25 ～1 000 mg · L-1范围内呈良好线性,标准曲线回归系数均大于0.99,RSD小于5％,回收率在91％～97％,溶菌酶、乳铁蛋白、α-乳白蛋白、血清白蛋白和β-乳球蛋白的检测限分别为0.2、4.0、0.6、0.3和1.0 mg·L-1;对猪乳中乳清蛋白进行测定显示,β-乳球蛋白、溶菌酶、乳铁蛋白和血清白蛋白含量在母猪分娩后16d内逐渐降低,其含量均在母猪分娩后第1天最高,分别为17.2、0.224、2.0和15.6 g·L-1,在第16天含量最低,分别为5.6、0.092、0.5和3.6 g·L-1;α-乳白蛋白含量在母猪分娩后逐渐升高,在第7天时含量达到最高为3.3g·L-1,随后降低,保持在3.1g·L-1.结果表明:建立的乳清蛋白高效液相色谱法,能够快速准确检测猪乳中5种乳清蛋白的含量.