利用杆状病毒表达系统表达鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白

Guangcai REN,Chuangao LIU,Miaorong HUANG,Wenke HUANG,Chuhong ZHONG,Yufu LIU,Ruiai CHEN

Animal Husbandry & Veterinary Medicine（2017）

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摘要

从GenBank下载传染性法氏囊病病毒(IBDV) VP2基因序列,根据昆虫细胞偏爱密码子对IBDV VP2基因进行密码子优化,化学合成优化后的VP2基因序列,然后构建杆状病毒表达载体pTriEx-4-VP2,构建成功的重组杆状病毒pTriEx-4-VP2转染sf9细胞,制备病毒原种,采用SDS-PAGE和Western blot方法鉴定VP2的免疫原性.结果显示:细胞感染Bac-VP2后,其细胞裂解蛋白在58 ku附近有1个条带,且该条带与IBD阳性血清发生特异性反应;间接免疫荧光试验(IFA)结果显示VP2基因能在Sf9细胞中表达;动物攻毒保护试验中,2次免疫重组VP2蛋白后能诱导14日龄SPF鸡产生对IBDV强毒攻击,保护率为60％.本研究为进一步研究IBDV VP2基因工程疫苗提供了物质基础.

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