PRV、PCV2与PPV三重PCR检测方法的建立与初步应用

为建立可同时检测猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)与猪细小病毒(PPV)的三重PCR方法,根据GenBank登录的病毒相关基因序列,选择保守区域设计引物,经过反应条件的优化,建立了可同时检测以上3种病毒的PCR诊断方法,扩增的目的片段长度分别为192 bp (PRV)、255 bp (PCV2)和759 bp (PPV).对PRV、PCV2和PPV的核酸检测最低浓度分别为:2.5×10-2,2.2×10-3和3.7×10-2 ng,证明该方法具有良好的特异性和较高的敏感性.应用该方法对56份临床样品进行检测发现,PRV、PCV2和PPV的阳性率分别为16.1％、50.0％和19.6％,二重感染率为12.5％,三重感染阳性率为3.6％.该方法的成功建立为快速高效地检测以上3种病毒提供了有效手段.