MALDI-TOF MS技术在病原菌检测与鉴定中的应用研究

病原微生物引起的动物疾病不仅严重影响到动物的经济价值也威胁着人类健康,随着近年来抗菌药物的滥用导致多种细菌耐药以及部分新型细菌的出现使形势更加严峻.传统的微生物鉴定方法主要有表型的检测,包括革兰染色、微生物分离培养和生化试验等,因时间较长、鉴定范围窄,影响了病原微生物鉴定的速度和准确性,在一定程度上影响了疾病的控制.基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Matrix assisted laser desorption/Ionization time of flight mass spectrometry MALDI-TOF-MS)是近年来发展起来的应用于微生物快速检测的一项技术.基于绘制微生物的蛋白质指纹图谱与已知标准微生物的蛋白指纹图谱数据库进行比较达到鉴定的目的.不同的细菌经MALDI-TOF MS检测可以形成特异性的指纹图谱,建立这些细菌的图谱库,将待测细菌的质谱图与已有质谱图库进行比较,即可确定细菌种属.由于所得到的蛋白质图谱中主要的分子离子峰为菌体内高丰度、表达稳定且进化保守的核糖体蛋白,因此其鉴定结果稳定、可靠.