犬脂肪干细胞的分离培养与鉴定

为了研究脂肪干细胞(Adipose-derived stem cells,ASCs)体外培养方法及其生物学特性,将ASCs应用于小动物临床治疗,本试验用犬进行了脂肪干细胞的分离、培养和鉴定.犬脂肪干细胞(Canine adipose-derived stem cells,cASCs)体外培养生长良好,呈细长梭形.第3代(P3)细胞诱导2周后,成脂诱导组经油红O染色可见细胞内脂滴积累;成骨诱导组经碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,AKP)及VonKossa染色,AKP、钙结节均呈阳性表达.第3代至第5代(P3～P5)细胞流式细胞检测结果显示,所分离细胞稳定高表达间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)标志CD29、CD44、CD90(＞90％),不表达造血细胞标志CD45(＜2％).培养结果显示,从犬镰状韧带和皮下脂肪均可分离出cASCs.cASCs取材方便,易于体外培养,多次传代及冻存对cASCs的生物学性质无明显影响.cASCs有望成为国内动物医学临床研究和治疗的重要干细胞来源.