牛流行热病毒荧光定量PCR检测方法的建立

Pigs and Poultry（2020）

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摘要

鉴于牛流行热(Bovine Ephemeral Fever,BEF)对养牛行业的危害以及荧光定量PCR技术高效、快速、精准的优点,本研究针对牛流行热病毒(Bovine Ephemeral Fever Virus,BEFV)G基因建立荧光定量PCR检测方法.并用所建立的荧光定量PCR检测方法对临床采集的样本进行检测.结果显示:在GenBank数据库中对BEFV全基因组序列进行比对分析,找出保守序列,设计1对扩增BEFV G基因片段的引物,通过分子克隆构建重组质粒制备标准曲线,扩增效率是95.1％,用所建立的方法检测临床样本,阳性15份,阳性率为75％.该试验成功建立了检测BEFV的荧光定量PCR检测方法,证明云南省的牛场中广泛存在BEFV,建立的荧光定量PCR检测方法对BEFV的临床诊断和流行病学调查等具有应用价值.

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