野生黑斑蛙皮肤抗菌肽快速分离、纯化方法的建立

抗菌肽(AMPs)也被称为抗微生物肽,是分子质量比较小,可以抗细菌、病毒及原虫等微生物的一类小肽[1-3],其来源广泛,且具有耐热、耐酸碱及对微生物重复使用不产生耐药性等特点[4-5].由于其特殊的性质和生物学活性,已成为新型抗菌药物的研究热点.将抗菌肽从成分复杂的样品中分离出来是困扰此类药物研究的关键问题之一.传统的分离方法复杂,采用蛋白质分离纯化的方法,如凝胶过滤色谱法[6-7]、离子交换色谱法[8-9]、制备型反相色谱法[10]等,将这些方法综合运用可获得纯度很高的抗菌肽,但步骤繁琐,产量低,甚至影响其生物学活性.因此,用最少的设备和简便的方法获得纯度较高和活性较强的抗菌肽是本研究的重点.将分析型高效液相色谱仪进行改造,使之成为抗菌肽的分离、纯化设备,以反相C18色谱柱为分离条件,经过优化色谱条件,对黑斑蛙皮肤分泌物进行分离、纯化,获得了抑菌活性较强、纯度较高的抗菌肽.该研究为抗菌新药的研制与开发提供了一种新的分离、纯化方法,有较高的利用价值,值得推广.