基于oppD/F基因的牛支原体贵州株分子生物学鉴定

为了确定疑似牛支原体(Mb)肺炎病例病原种类,试验采用分子克隆技术对牛支原体贵州流行株oppD/F基因进行了克隆、测序及序列分析.结果表明:所合成引物从支原体分离培养物中扩增出大小约为1 912 bp基因片段,与预期oppD/F基因片段的大小相符,其测序序列与GenBank数据库中参考株核苷酸同源性为42.6％ ～99.8％,与标准株核苷酸同源性为99.6％,与从发病动物中分离得到的内蒙株和湖北株同源性最高(均达到99.8％),与其他途径分离得到的参考菌株同源性都很低;系统进化树分析显示,牛支原体贵州分离株与标准参考株在同一进化分支上,与临床易混淆的丝状支原体丝状亚种存在明显差异.说明此次从疑似牛支原体肺炎病例中分离培养的支原体确为牛支原体.