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单增李斯特菌InlB的原核表达与多克隆抗体制备

Heilongjiang Animal Science and Veterinary Medicine(2020)

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Abstract
为了进一步研究单增李斯特菌分泌的细菌侵袭相关蛋白内化素B(InlB)的功能,试验通过原核表达载体pET-28a分别表达InlB的N36~321和C392~630,并通过Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,纯化的蛋白免疫Balb/c小鼠,制备多克隆抗体,通过Western-blot检测单增李斯特菌InlB的表达情况.结果 表明:成功构建重组表达质粒及诱导表达重组蛋白,制备的针对InlB N端和C端的多克隆抗体均能特异性检测单增李斯特菌中的InlB,但不能通过免疫荧光检测该菌表面的InlB.说明本研究制备的多克隆抗体可进一步用于研究单增李斯特菌InlB的功能.
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