猪葡萄球菌脱落毒素ExhA的表达与纯化

Pengfei ZHANG,Hanqin SHEN,Xiangcong LIU,Yanling LIU,Leyi ZHANG,Lei WANG,Changxu SONG

Heilongjiang Animal Science and Veterinary Medicine（2018）

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摘要

为了研究猪葡萄球菌脱落毒素ExhA的生物学活性,试验以猪葡萄球菌的基因组DNA为模板,PCR扩增ExhA全基因序列,连接到pCold TF表达载体上,构建重组质粒pCold TF-ExhA,将重组质粒转入E.coil BL2(DE3),IPTG低温诱导目的蛋白可溶性表达,重组表达的蛋白用Ni-IDA琼脂糖纯化树脂纯化,Western-blot及攻毒试验验证表达蛋白质的生物学功能.结果表明:成功构建了pCold TF-ExhA重组质粒,并且脱落毒素ExhA主要以可溶性形式表达,表达纯化的脱落毒素ExhA具有完整的生物学活性.说明表达的脱落毒素ExhA具有良好的抗原性.

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