高速逆流色谱法分离制备南极磷虾虾粉抗氧化肽

Furong LI,Wenzheng SHI,Yan LI

Journal of Shanghai Ocean University(2019)

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摘要
采用复合蛋白酶酶解南极磷虾得到虾粉多肽,经超滤分离和高速逆流色谱技术进行分离纯化并检验其体外抗氧化活性.结果 表明:经超滤分离后的多肽在分子量范围为5 ~ 10 ku时多肽抗氧化活性最好,当浓度为10 mg/mL时,其超氧阴离子自由基清除率达到21.28%,DPPH自由基清除率为86.52%,对羟基自由基清除率为53.49%,Fe2螯合率为85.35%.对分子量范围在5~10 ku的多肽进行高速逆流色谱分析,采用体积比为氯仿:丁醇:甲醇:水=4:0.75:3:2作为两相溶剂体系,下相作固定相,上相作流动相;反转,转速900r/min,恒温水浴温度为25℃,在流动相的流速1.5 mL/min,进样浓度20 mg/mL的条件下分离得到5个组分.经测定:当浓度为5 mg/mL时,P3组分清除超氧阴离子自由基的能力和Fe2+螯合能力均显著高于其余4个组分,分别为37.18%和92.33%,P2组分的DPPH自由基清除率最高,为90.33%,P5组分的羟基自由基清除率最高,为70.11%.与未经HSCCC分离的对照组相比,抗氧化活性均得到明显增强.
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