同步接毒条件下鳜传染性脾肾坏死病毒在CPB细胞中的最适增殖条件

Journal of Fisheries of China(2015)

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摘要
为了获知鳜传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)同步接毒最适增殖条件,通过检测不同血清浓度、病毒接种量、细胞状态等培养条件下的病毒拷贝数,确定鳜脑组织细胞(CPB)同步接种ISKNV的最适体外增殖条件.结果表明,上述各因素对ISKNV的增殖量均有明显影响.其中选取处于对数生长中期的CPB细胞,胰酶消化后按照病毒感染复数(MOI)为0.2同步接种ISKNV,培养液中胎牛血清终浓度为6%时,28℃恒温培养9d后收获,所得病毒拷贝数最多,为2.54×108拷贝/mL.将所测得病毒拷贝数折算成培养基成本进一步分析表明,按照上述相同条件进行接毒,每元人民币培养基所得病毒量也最高,为4.24×1011拷贝.综上所述,本研究基于病毒增殖量及培养基成本对病毒增殖条件进行优化,可为低成本ISKNV疫苗的生产提供理论依据.
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关键词
proliferation condition,CPB cells,synchronous inoculation,Siniperca chuatsi,qPCR,infectious spleen and kidney necrosis virus (ISKNV)
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