鳗弧菌、溶藻胶弧菌外膜蛋白的分离及特性

分别用SDS、Sarkosyl及PMSF法分离制备鳗弧菌(Vibrio anguillarum)、溶藻胶弧菌(Vibrio alginolyticus)主要外膜蛋白(MOMP),通过SDS-PAGE分析比较2种弧菌主要外膜蛋白的组成结构.结果表明,SDS、Sarkosyl和PMSF法分离提取的鳗弧菌和溶藻胶弧菌外膜蛋白中,SDS-PAGE电泳图谱不同,鳗弧菌外膜蛋白分子量为27～138 kD;溶藻胶弧菌外膜蛋白分子量为27～104 kD,其中,45 kD、30 kD和27 kD外膜蛋白为鳗弧菌和溶藻胶弧菌所共有.经比较,Sarkosyl法对2种弧菌外膜蛋白的提取效果较好.对3种方法提取的2种弧菌的主要外膜蛋白进行SDS PAGE后,分别与吸附后的兔抗鳗弧菌、抗溶藻胶弧菌血清的Western-blotting印迹显示,兔抗鳗弧菌血清与其菌株的外膜蛋白主要有3条免疫反应带,其分子量分别为97 kD、51 kD和30 kD,说明其可能与鳗弧菌抗原的特异性有关;兔抗溶藻胶弧菌血清与其菌株的外膜蛋白主要有2条免疫反应带,其分子量分别为51 kD 和27 kD,说明可能与溶藻胶弧菌抗原的特异性有关,而51 kD外膜蛋白可能是2种弧菌共有的特异性抗原.