外源性神经激肽B对大鼠初情期的影响

[目的]研究神经激肽B(NKB)中枢给药对大鼠初情期启动、下丘脑Kisspeptin和促性腺激素释放激素(GnRH)基因及蛋白质的表达水平,以及血清中性腺激素含量的影响,以了解NKB在调节初情期方面的作用.[方法]将初情期前SD雌性大鼠分为NKB组、NKB拮抗剂组和对照组,分别侧脑室注射60 pmol/μL NKB溶液、0.3nmol/μL NKB拮抗剂和生理盐水,注射剂量为10 μL/只,每日观察阴门开启情况,统计阴门开启时间.所有大鼠均在阴门开启时采集血样,分离血清,并采集下丘脑、卵巢、子宫,称卵巢、子宫质量.分别采用免疫荧光共定位和实时荧光定量PCR(RT qPCR)技术,分析下丘脑中GnRH和Kisspeptin蛋白和基因的表达情况,并分别通过酶联免疫吸附法(ELISA)和放射性免疫法(RIA)检测血清中NKB和性腺激素(雌二醇、孕酮)水平.[结果]NKB使大鼠阴门开启时间显著提前(P＜0.05),卵巢质量显著降低(P＜0.05),对子宫质量无明显影响(P＞0.05);NKB拮抗剂使阴门开启时间显著推迟(P＜0.05),对卵巢和子宫质量无显著影响(P＞0.05).与对照组相比,NKB组SD大鼠下丘脑Kiss1和GnRH mRNA的表达显著提高(P＜0.05);GnRH+细胞数量在室旁核(PVN)和正中隆起(ME)显著增加(P＜0.05),而在下丘脑弓状核(ARC)中显著减少(P＜0.05),Kisspeptin+细胞数量在ARC和室周核(PeN)中显著增加(P＜0.05),在PVN中无显著差异(P＞0.05);血清中E2和P4水平均显著增加(P＜0.05).但在NKB拮抗剂组中,SD大鼠下丘脑Kiss1和GnRH mRNA的表达低于对照组,但无显著差异(P＞0.05),GnRH+细胞数量在ARC中显著增加(P＜0.05),在室旁核PVN和ME则显著降低(P＜0.05),ARC和PeN中Kisspeptin+细胞的数量显著减少(P＜0.05),且血清中E2和P4水平均显著降低(P＜0.05).[结论]NKB通过调节下丘脑Kisspeptin和GnRH的表达以及提高血清中E2和P4水平来促进大鼠初情期启动.