朝鲜鹌鹑MHC class I基因第2、3外显子多态性与NDV抗性的关联分析

[目的]研究朝鲜鹌鹑MHC class I基因第1,2和3外显子的多态性,并与新城疫病毒抗性进行关联分析.[方法]采用胸肌注射的方法对14日龄朝鲜鹌鹑进行新城疫La Sota弱毒株攻毒,每周注射1次,连续攻毒3周后,心脏采血,采用β-微量法测定血清中新城疫抗体水平.PCR扩增朝鲜鹌鹑MHC class I基因,测序后采用DNA Star、SPSS等分析软件研究朝鲜鹌鹑MHC class I基因第1,2,3外显子的多态性,并分析不同基因型新城疫抗体水平的差异.[结果]朝鲜鹌鹑的新城疫抗体效价为26～210.PCR扩增获得了1290 bp的MHC class I基因,其编码区序列为780 bp,编码259个氨基酸.通过与已知序列日本鹌鹑RNA(AB005528)比对,得到长度分别为76,272和274 bp的第1,2和3外显子.在第1外显子上未检测到突变为点,在第2和3外显子上共检测到11个突变位点(第2外显子上4个突变位点:257 bp(A/C)、267 bp(A/T)、366 bp(A/G)和500 bp(T/G);第3外显子上7个突变位点:795 bp(T/C)、798 bp(T/C)、810 bp(T/G)、830 bp(A/G)、873 bp(A/T)、927 bp(A/G)和932 bp(C/G)),均为中度多态基因座,11个突变位点中,267 bp(A/T)、830 bp(A/G)、873 bp(A/T)、932 bp(C/G)突变导致编码氨基酸改变,500 bp(T/G)、8H bp(A/T)、932 bP(C/G)突变位点基因型之间新城疫抗体水平存在显著差异(P＜0.05).[结论]朝鲜鹌鹑MHC class I基因第2、3外显子具有丰富的多态性,并且与新城疫病毒抗性相关.