气肿疽梭菌多克隆抗体的制备及Dot-ELISA检测方法的建立

为建立快速有效的气肿疽检测方法,制备气肿疽梭菌多克隆抗体.以斑点酶联免疫吸附方法,筛选出最佳工作条件,确定抗体最佳稀释度为1:1024;可检测到最低菌体抗原量为3.125μg,最低分泌抗原量为1.89μg;最适酶标二抗浓度为1:4000.应用该方法检测20份死于气肿疽的豚鼠脏器,其中肝脏、脾脏、心脏、肺脏、肾脏、肌肉阳性率分别为95％、95％、90％、90％、85％和90％;与琼脂免疫扩散试验(AGID)法相比,灵敏度是其40倍.该试验成功建立了检测气肿疽病原体的Dot-ELISA方法.