马尾松水通道蛋白PmPIP1基因克隆及在干旱胁迫下的表达分析

克隆马尾松Pinus massoniana水通道蛋白（AQP），并对其生物信息学与干旱胁迫表达模式进行分析。采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）以及互补脱氧核糖核酸（cDNA）末端快速扩增（RACE）方法克隆马尾松水通道蛋白基因。采用实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）分析其在干旱胁迫下的响应模式。结果克隆到一个马尾松水通道蛋白基因，命名为PmPIP1（GenBank登录号为KF582038）。此基因cDNA全长序列为1301 bp，包括867 bp的完整开放阅读框，99 bp 的5′末端非翻译区和335 bp 的3′末端非翻译区。编码288个氨基酸残基，分子量为30.86 kD，等电点（pI）8.48。 PmPIP1与菠菜Spinacia oleracea （2b5fA）水通道蛋白结构相似。 PmPIP1含有6个跨膜区，具有膜内在蛋白（MIP）家族信号序列、高等植物高度保守序列HINPAVTFG和2个天门冬酰胺-脯氨酸-丙氨酸（NPA）保守肽段。 PmPIP1基因属质膜内在蛋白（PIPs）亚族，与挪威云杉Picea abies 水通道蛋白基因亲缘关系最近，同源性达95%。 qRT-PCR表明PmPIP1受干旱胁迫诱导表达。马尾松PmPIP1的克隆丰富了植物AQP基因的资料库，同时推测PmPIP1基因可能参与了马尾松干旱胁迫过程。图8表1参39