楸树花粉壁蛋白质提取及特异性

为了进一步研究楸树Catalpa bungei自交不亲和特性,以楸树不同产地植株云台山楸树(CB-1),老山楸树(CB-2)和滇楸Catalpa fargesi f.duclouxii (CF)的花粉为对象,利用普通研磨法及超声波破碎法,研究了适合于花粉壁蛋白质提取的方法.同时采用考马斯亮蓝染色法及聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)比较了不同树种花粉蛋白质质量分数及其主要蛋白质组分.结果表明:超声波破碎法适于花粉壁蛋白质的提取,最佳超声参数为功率400 W,超声时间3s·次-1,间歇时间6s·次-1,3个回合,工作120次,相隔5 min·回合-1.蛋白质提取液三羟甲基氨基甲烷(Tris-HCl)的pH 7.8最佳.不同树种的花粉壁蛋白质质量分数表现为滇楸最高,云台山楸树和老山楸树较低.蛋白质组分研究表明:各树种花粉共有蛋白质有26个,特异蛋白质为连楸53.8 kD,35.0 kD,23.4 kD,26.5 kD;老楸53.8 kD,38.5 kD,23.4 kD;滇楸38.5 kD,26.5 kD.