中华蜜蜂嗅觉受体基因 A cerOR141 的克隆与表达分析

[目的]克隆鉴定中华蜜蜂 A pis cerana cerana嗅觉受体基因A cerOR141 ,并对其全长序列和表达谱进行分析,为该基因的功能研究奠定基础. [方法]利用PCR扩增和基因克隆技术获得中华蜜蜂嗅觉受体基因 A cerOR141的cDNA全长序列;利用多种生物信息学软件对该基因编码的氨基酸序列进行结构预测、序列比对和进化树分析;利用qRT‐PCR技术检测该基因在1 、5 、10 、15 、20 、25和30日龄工蜂各组织中的表达情况. [结果]A cerOR141 cDNA全长为1 659 bp ,ORF序列长度为1 299 bp ,编码432个氨基酸,有7个跨膜结构且 N端位于胞内,无信号肽,第184～421位氨基酸之间存在一个昆虫嗅觉受体7tm‐6 superfamily 的保守结构域.序列比对和进化树分析表明,A cer‐OR141与西方蜜蜂 A melOR141的亲缘关系最近,氨基酸序列一致性高达91%.荧光定量 PCR结果显示,A cer‐OR141 mRNA在工蜂触角和头部的表达较高,且极显著高于其他组织(P＜0.01 ) ;在胸、腹、足和翅膀中仅有微量的表达. [结论]克隆获得 A cerOR141的全长cDNA序列,其编码产物具有昆虫嗅觉受体的典型结构特征;明确了该基因在中华蜜蜂成蜂触角和头部中有较高的表达,推测其表达产物为普通嗅觉受体蛋白,可能参与挥发性气味分子的识别过程.