紫苏PfDGAT1酵母功能互补分析

[目的]本试验将已克隆的紫苏种子中高表达二酰甘油酰基转移酶(DGAT )基因 Pf DGA T1转化至酿酒酵母突变型菌株 H1246进行酵母互补功能验证,研究二酰甘油酰基转移酶是否具有催化油脂合成的作用. [方法]通过构建紫苏 DGA T基因的酵母表达载体pYES2.0-P f DGA T1并转化至酿酒酵母突变型菌株 H1246 ,用尼罗红对转基因酵母细胞染色,检测转基因酵母中是否能合成油体;利用薄层层析(T LC )试验检测转基因酵母中是否存在三酰甘油(T AG ) . [结果]转pYES2.0-P f DGA T1载体的突变型酵母菌株H1246能够检测到有油体存在,而转pYES2.0空载体的突变型酵母菌株 H1246 中没有检测到油体,说明紫苏 P f DGA T1基因的表达恢复了酿酒酵母突变型菌株H1246油体缺陷的表型,可以催化TAG合成. [结论] P f DGA T1基因在紫苏种子油脂合成积累过程中发挥重要作用,该研究结果为深入解析 P f DGA T1基因在紫苏油脂合成途径中的功能奠定了基础.