改良CTAB法对山茶属植物基因组 DNA提取的比较研究
Acta Agriculturae Universitatis Jiangxiensis(Natural Sciences Edition)（2017）
摘要
山茶属植物体内酚类、多糖等次生代谢物质含量较高,获得高纯度的总DNA比较困难.为筛选出适宜山茶属植物基因组DNA的较优提取方法,并研究不同材料处理方法的差异,采用四因素三水平的正交设计,对山茶属植物基因组DNA的提取方法CTAB法进行优化.最后确定较优提取方法为:老叶用CTAB-free去除多糖并防止酚氧化,用2%CTAB、2%PVP、24:1抽提2次;嫩叶用2×CTAB去除多糖并防止酚氧化,用1%CTAB、2%PVP、24:1抽提1次,并用ISSR-PCR检测.结果显示采用优化方案提取的DNA质量更好,能较好地溶于TE,可用于ISSR-PCR扩增,且扩增出清晰的条带.
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